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小鼠原代骨骼肌細胞
小鼠原代骨骼肌細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-514
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 小鼠原代骨骼肌細胞
商品貨號 MZ-514
組織來源 昆明、C57小鼠(出生1-3天)3-5只
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
培養基 建議購買原代配套完培
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 骨骼肌衛星細胞是位于基膜與肌膜之間未分化的細胞,一般情況下處于靜止狀態,當肌細胞受到損傷刺激時,衛星細胞被激活,更新,增殖,分化并與原有的骨骼肌細胞相互融合,形成新的肌纖維細胞。 肌組織作為人體的最大組織,同其它組織相比來源更豐富。大量研究證實衛星細胞對骨骼肌受創傷后肌纖維的再生和修復起著重要作用。細胞鑒定肌動蛋白(α-actin)免疫熒光染色為陽性
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主要功能 (1) 骨骼肌受損時,靜止的、被稱為衛星細胞的成肌細胞被激活增殖、遷移、最終 分化。 (2) 多種的細胞信號途徑,包括磷脂酰肌醇(-3)激酶、鈣神經素、JAK2/STAT3 和有絲分裂原活化蛋白激酶,參與骨骼肌的生長。
主要病生理變化 (1) 骨骼肌萎縮。 (2) 骨骼肌拉傷。 (3) 骨骼肌壞死。
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