| 產(chǎn)品名稱 |
人毛囊角質(zhì)細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-8388 |
| 中文名稱 |
人毛囊角質(zhì)細胞 |
| 組織來源 |
人，頭皮 |
| 形態(tài)特征 |
上皮細胞樣 |
| 生長特性 |
貼壁生長 |
| 特征特性 |
毛囊是包圍在毛發(fā)根部的囊狀組織，內(nèi)層是上皮組織性毛囊，外層是結締組織性毛囊，內(nèi)層與表皮相連，外層則與真皮相連。 毛囊作為一種重要的皮膚附屬器官，最為顯著的特點是始終處于生長期、退行期和休止期的周期性循環(huán)中。在毛囊的形態(tài)學和周期性循環(huán)中，毛囊的角質(zhì)細胞作為一種特殊類型的角質(zhì)形成細胞，受毛乳頭細胞分泌的一些細胞因子或信號因子等作用，迅速發(fā)生分化增殖或凋亡，進而誘導毛囊進入生長期或退行期。廣譜角蛋白((PCK)免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%。 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
人毛囊角質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基 |
| 傳代方法 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 復蘇細胞步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
