在一個(gè)健康人腸道中棲息著大量的細(xì)菌。小腸上端細(xì)菌較少，下端急劇增多。大腸則是各種細(xì)菌 理想的存在環(huán)境，大腸下端約有 100 多種細(xì)菌菌群，其細(xì)菌濃度可達(dá) 10 11個(gè)/ g 大便，即大便重量的 1/3 是細(xì)菌，這些細(xì)菌對(duì)人體來說，有些是有益菌，有些是有害菌，它們按一定的菌群比例定植于腸壁上。在正常情況下，由于有益菌(主要是雙歧桿菌)在數(shù)量上占明顯優(yōu)勢(shì)，使細(xì)菌種群之間、細(xì)菌與人之間，保持著一種共生的生態(tài)學(xué)關(guān)系和動(dòng)態(tài)平衡。

 

如果菌群比例失調(diào)、雙歧桿菌數(shù)量減少就會(huì)導(dǎo)致人體的病變，同樣當(dāng)人體健康狀況變化，如創(chuàng)傷、大量使用抗生素、機(jī)體衰老等均會(huì)導(dǎo)致腸道菌群種類和數(shù)量的 變化，反過來又對(duì)機(jī)體健康不利而形成惡性循環(huán)。

 

雙歧桿菌屬中有 24 個(gè)種，其中常見和常用的種有：嬰兒雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、長雙歧桿菌、青春雙歧桿菌和短雙歧桿菌。雙歧桿菌的代謝產(chǎn)物對(duì)致病菌具有很強(qiáng)的拮抗作用。它們的抑菌機(jī)理主要是 產(chǎn)生有機(jī)酸使腸道 pH 值降低，抑制了致病菌的生長繁殖；有些雙歧桿菌的種還可以產(chǎn)生抗菌類物質(zhì)。

 

青春雙歧桿菌 （Bifidobacterium adolescentic）是青年個(gè)體腸道中的優(yōu)勢(shì)菌，對(duì)人體產(chǎn)生許多益生作用。但由于青春雙歧桿菌對(duì)氧非常敏感，對(duì)低 pH 的抵抗能力差，并對(duì)營養(yǎng)要求苛刻，在獲取高活菌數(shù)培養(yǎng)物時(shí)有一定困難。研究指出凝膠微球包囊法能夠改善青春雙歧桿菌暴露在胃腸道時(shí)的存活率；許多研究報(bào)道添加蛋白胨、半胱氨酸、酵母浸出物、寡聚糖等營養(yǎng)物質(zhì)可以提高雙歧桿菌的活菌數(shù)，但成本過高、操作繁瑣，不適合大規(guī)模生產(chǎn)使用。

 

二、應(yīng)用

 

1、有研究益生菌制劑來源的青春雙歧桿菌對(duì)大腸埃希菌的體外抑菌作用。

 

將青春雙歧桿菌與大腸埃希菌分別單獨(dú)培養(yǎng)，測(cè)定不同培養(yǎng)時(shí)間的 pH 值和活菌數(shù)，然后將兩菌進(jìn)行混合培養(yǎng)，再測(cè) pH 值和活菌數(shù)，并與單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)的結(jié)果 進(jìn)行比較。結(jié)果顯示瓊脂平板打孔法顯示青春雙歧桿菌上清液有抑菌功能；共培養(yǎng)法顯示青春雙歧桿菌可抑制大腸埃希菌增殖的數(shù)量，而自身數(shù)量不受影響。因此青春雙歧桿菌的酸性代謝產(chǎn)物是主要的抑菌物質(zhì)。

 

還有研究用耐氧青春雙歧桿菌，利用其培養(yǎng)物上清、蛋白提取液和多糖提取液做抗菌試驗(yàn) 結(jié)果表明：其培養(yǎng)物上清和多糖提取液的抗菌作用相似，只對(duì)革蘭陽性菌作用較強(qiáng)，說明耐氧青春雙歧桿 菌的抗菌作用與其產(chǎn)生的胞外多糖有關(guān)；但由于胞外多糖的提取不完全，因此多糖水溶液的抗菌作用弱于 細(xì)菌培養(yǎng)物上清。

 

至于其抗菌作用機(jī)制，可能與革蘭 陽性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有關(guān)。而青春雙歧桿菌的蛋白提 取液無抗細(xì)菌和真菌作用，多糖提取液具有較弱的抗 革蘭陰性菌的作用，其抗菌機(jī)制可能是因?yàn)槎嗵翘崛∫褐泻兴嵝晕镔|(zhì)，其 pH 偏低有關(guān)。

 

2、制備青春雙歧桿菌凝固型酸奶。

 

有研究以鮮牛奶、白砂糖為主要原料，以青春雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌為發(fā)酵劑，制成營養(yǎng)保健的青春雙歧桿菌凝固型酸奶。通過試驗(yàn)確定了青春雙歧桿菌凝固型酸奶最佳工藝為：白砂糖8%，接種量3%，保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌青春雙歧桿菌，發(fā)酵4 h。

 

結(jié)合MRS培養(yǎng)基和LM-MRS培養(yǎng)基可以對(duì)青春雙歧 桿菌凝固型酸奶中三種乳酸菌分別計(jì)數(shù)。青春雙歧桿菌凝固型酸奶中保加利亞乳桿菌活菌數(shù)為8.0×108 cfu·mL-1，嗜熱鏈球菌活菌數(shù)為8.5×108 cfu·mL-1，青春雙歧桿菌活菌數(shù)為2.0×106 cfu·mL-1。工藝流程如下：

 

 

3、青春雙歧桿菌對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎( UC) 患者血清相關(guān)因子有一定影響。

 

有實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( ELISA) 法檢測(cè) UC 患者治療前后及正常對(duì)照組血清腫瘤壞死因子( TNF) -α，干擾素( IFN) -γ，白細(xì)胞介素( IL) -6 及 IL-10 的水平，并分別比較各組細(xì)胞因子水平的差異。

 

結(jié)果顯示 UC 患者血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平明顯高于正常對(duì)照組，而 IL-10 水平明顯低于正常對(duì)照組；傳統(tǒng)治療組及雙歧桿菌治療組血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平較治療前下降，而 IL-10 水平較治療前升高，兩治療組與正常對(duì)照組相比無明顯差異因此青春雙歧 桿菌可以降低 UC 患者血清促炎因子 TNF-α、IFN-γ 及 IL-6 水平，還可升高抑炎因子 IL-10 水平，調(diào)節(jié)腸黏膜的細(xì)胞免疫功能，可用于 UC 的治療。

 

4、代謝低聚木糖。

 

有研究對(duì)青春雙歧桿菌代謝低聚木糖的動(dòng)力學(xué)行為進(jìn)行了探討，同時(shí)對(duì)青春雙歧桿菌代謝低聚木糖時(shí)各組分的變化規(guī)律及代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，青春雙歧桿菌代謝低聚木糖 48 h后，總糖質(zhì)量濃度從最初的 5.00 g/L降至 3.59 g/L，菌體質(zhì)量濃度從 0.10 g/L上升至 0.35 g/L，培養(yǎng)體系的 pH 值從 7.00降至 4.75。

 

青春雙歧桿菌代謝低聚木糖時(shí)，首先代謝木二糖至木五糖組分，此后，其分泌的 α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶將低聚木糖組分中的阿拉伯糖基側(cè)鏈水解釋放，并作為青春雙歧桿菌的碳源。代謝過程中，青春雙歧桿菌還能分泌 β-D-木糖苷酶作用于低聚木糖的末端，釋放出木糖，最終導(dǎo)致木糖在培養(yǎng)體系中累積。代謝產(chǎn)物分析結(jié)果顯示，青春雙歧桿菌代謝低聚木糖的代謝產(chǎn)物主要有乳酸、乙酸、丙酸和丁酸。

 

三、培養(yǎng)條件

 

通過單因素試驗(yàn)確定青春雙歧桿菌工業(yè)化培養(yǎng) 基成分為：脫脂乳 8%（W/V）、雙歧因子 A 1%（W/ V）、雙歧因子 B 1%（W/V）。利用上述培養(yǎng)基，確 定了青春雙歧桿菌的最佳接種量為 1%（V/V）、最佳 培養(yǎng)溫度為 37 。在此條件下，測(cè)定了青春雙歧 桿菌的生長曲線和 pH 值變化，在 37 厭氧條件下 培養(yǎng)時(shí)間 9 h 為最佳生長條件，此時(shí)青春雙歧桿菌 活菌數(shù)最高可達(dá) 1.16×109 cfu·mL-1。雙歧因子 A 的 存在對(duì)青春雙歧桿菌的生長有明顯促進(jìn)作用。