| 產(chǎn)品名稱 |
RMSC-bm-LUC |
| 商品貨號 |
MZ-3344 |
| 中文名稱 |
大鼠骨髓間充質干細胞-熒光素梅標記 |
| 特征特性 |
間充質干細胞是一類很有特性的細胞。它們有發(fā)育為成熟細胞的潛在能力而產(chǎn)生脂肪、軟骨、骨骼和肌肉。它們發(fā)育中的可塑性使人們對用間充質干細胞來替換受損組織的潛在能力產(chǎn)生了極大的興趣。間充質干細胞無血清培養(yǎng)，在轉化生長因子作用下會分化成軟骨細胞。相反，在有血清、抗壞血酸和地塞米松的作用下會分化成成骨細胞。間充質干細胞有潛能唄移植到受傷的部位或者種植到仿生支架上生長形成適當?shù)慕M織結構。 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
由 500 ml 基礎培養(yǎng)基、25 ml 胎牛血清、 5ml 間充質干細胞生長因子和 5ml 青霉素/ 鏈霉素溶液，分別包裝，使用時請按配比添加使用，配比 100：5：1：1。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 復蘇細胞步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
