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GS115 Strain
GS115 Strain
規(guī)格:
貨期:
編號(hào):B98222
品牌:Mingzhoubio

標(biāo)準(zhǔn)菌株
定量菌液
DNA
RNA

規(guī)格:
凍干粉
斜面
甘油
平板


產(chǎn)品名稱 GS115 Strain
商品貨號(hào) B98222
規(guī)格 100μl
儲(chǔ)存 -20℃
基因型 His4（基因型），Mut+（表型）
基本信息 培養(yǎng)基：YPDA 菌株類別：酵母菌 培養(yǎng)條件：28℃，有氧，YPDA 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化：電激 保存方式：30%甘油，-20℃ 基本應(yīng)用：用于蛋白表達(dá) 備注：
菌株簡(jiǎn)介 GS115是畢赤酵母菌株，屬于真核細(xì)胞。一般的針對(duì)原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對(duì)酵母是無(wú)效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對(duì)酵母培養(yǎng)菌株污染，往往會(huì)在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來(lái)抑制細(xì)菌菌的污染和生長(zhǎng)。GS115畢赤酵母自身表型為Mut+，但是GS115轉(zhuǎn)化株既能夠產(chǎn)生出Mut+菌株，也能夠產(chǎn)生出Muts菌株。目的蛋白在這兩種轉(zhuǎn)化株的表達(dá)水平可能是不同的，并且具有不可預(yù)測(cè)性，所以只有通過(guò)實(shí)驗(yàn)才能得到最好的酵母表達(dá)方案。 畢赤酵母適宜的生長(zhǎng)溫度是28至30度，溫度超過(guò)32度對(duì)蛋白的表達(dá)是有害的，并可能導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。GS115畢赤酵母是是組氨酸缺陷型（His4基因型），如果表達(dá)載體上攜帶有組氨酸基因，可補(bǔ)償宿主菌的組氨酸缺陷，因此可以在不含組氨酸的培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子。這些受體菌自發(fā)突變?yōu)榻M氨酸野生型的概率一般低于10-8。GS115畢赤酵母可以在YPD培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，或者在補(bǔ)充有組氨酸的minimal media中生長(zhǎng)，但是無(wú)法在單獨(dú)的minimal media培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。 巴斯德畢赤酵母，是甲醇營(yíng)養(yǎng)型酵母中的一類能夠利用甲醇作為唯一碳源和能源的酵母菌。與其它酵母一樣，在無(wú)性生長(zhǎng)期主要以單倍體形式存在，當(dāng)環(huán)境營(yíng)養(yǎng)限制時(shí)，常誘導(dǎo)2個(gè)生理類型不同的接合型單倍體細(xì)胞交配，融合成雙倍體。巴斯德畢赤酵母的另一個(gè)生物學(xué)特點(diǎn)是，甲醇代謝所需的醇氧化酶被分選到過(guò)氧化物酶體中，形成區(qū)域化。以葡萄糖作碳源時(shí)，菌體中只有1個(gè)或很少幾個(gè)小的過(guò)氧化物酶體，而以甲醇作碳源時(shí)，過(guò)氧化物酶體幾乎占到整個(gè)細(xì)胞體積的80%，AOX增至細(xì)胞總蛋白的35%-40%。因此，當(dāng)在AOX基因前利用同源重組方式插入外源蛋白基因時(shí)，可獲得大量表達(dá)。同時(shí)，根據(jù)甲醇酵母這種可以形成過(guò)氧化物酶體的特性，既可利用該系統(tǒng)表達(dá)一些毒性蛋白和易被降解的酶類，也可用以研究細(xì)胞特異區(qū)域化的生物發(fā)生及其機(jī)制和功能，為高等動(dòng)物類似的研究提供啟示。
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