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人視網膜神經膠質瘤細胞(WERI-RB-1)

人視網膜神經膠質瘤細胞WERI-RB-1介紹:人視網膜神經膠質瘤細胞WERI-RB-11974R.M. McFall T.W. Sery建立的兩株人眼癌細胞系中的一株。 細胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 掃描電鏡顯示在表面囊泡,板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。 細胞分化研究,腫瘤治療的動物模型和生化評價都涉及這株細胞。

人視網膜神經膠質瘤細胞WERI-RB-1特性:

1 來源:視網膜

2 形態(tài):圓形細胞聚集成葡萄狀,懸浮生長

3 含量:>1x106

4 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 運輸和保存

1)使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞

2)收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉移至T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

人視網膜神經膠質瘤細胞WERI-RB-1用途:僅供科研使用。

細胞接收后的處理:

1 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h

3 T25瓶中的細胞培養(yǎng)基離心后,去上清,添加6ml完全培養(yǎng)基,加入新的T25瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.

5 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。

人視網膜神經膠質瘤細胞WERI-RB-1培養(yǎng)步驟

一.人視網膜神經膠質瘤細胞WERI-RB-1培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1 準備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%

2 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%,即可進行傳代培養(yǎng)。

注:第一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。

3細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類;

1細胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

24min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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