絨猴EBV 轉化的白細胞(B95-8)介紹：絨猴EBV 轉化的白細胞(B95-8)源自暴露于人白血球中抽提的EB 病毒的絨猴白血球。B95-8 是一個連續株并釋放高滴度的轉染EB 病毒。此細胞株提供EB 病毒用于建立人的連續淋巴細胞株。

絨猴EBV 轉化的白細胞(B95-8)特性：

1） 來源：外周血淋巴細胞

2） 形態：淋巴母細胞樣，懸浮生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25 瓶或者1mL 凍存管包裝

細胞接受后的處理：

1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。

2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25 瓶置于37℃培養約2-3h。

3）棄去T25 瓶中的培養基，添加6ml 明舟生物（mingzhoubio）附帶的完全培養基。

4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml 明舟生物（mingzhoubio）附帶的完全培養基。

5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。

絨猴EBV 轉化的白細胞(B95-8)用途：僅供科研使用。

明舟生物（mingzhoubio）的絨猴EBV 轉化的白細胞(B95-8)培養操作規程，供參考

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640 培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL 細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL 培養基的15ml 離心管中混合均勻。在1000RPM 條件下離心4 分鐘，棄去上清液，加入1mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml 培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5 分鐘，棄去上清液，補加1-2mL 培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2 到1：3 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5 分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO 搖勻后進行凍存。

注意事項：

1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。