大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)介紹：B. Kimes and B. Brandt 從源于BD1X 大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆了
1） 來源：心臟
2） 形態(tài)：成肌細(xì)胞，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25 瓶或者1mL 凍存管包裝
細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25 瓶置于37℃培養(yǎng)約
3）棄去T25 瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml 明舟生物（mingzhoubio）附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml 本公司附
5）接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時(shí)與我
大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)用途：僅供科研使用。
明舟生物（mingzhoubio）的大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM 培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL 細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS 潤洗細(xì)胞1-2 次。
2. 加2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培
3. 輕輕吹打后吸出，移入15ml 離心管中，在1000RPM 條件下離心4 分鐘，
4. 移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml 培養(yǎng)基的T-25 培養(yǎng)瓶中或含有14ml 培養(yǎng)
3）細(xì)胞細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，先
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，
