人食管癌細胞(Eca-109)介紹：人食管癌細胞(Eca-109)1973 年建系，來自人食管中段鱗癌組織，小塊法原代培養建系。BALB/c 裸鼠移植成瘤，北京協和建系。
1） 來源：食管癌
2） 形態：上皮細胞樣
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25 瓶或者1mL 凍存管包裝
運輸和保存：
使用含有優質胎牛血清的2ml 凍存管發送存活細胞。收到細胞后，
細胞用途：僅供科研使用。
人食管癌細胞(Eca-109)培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37 攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL 培養基混合均勻。在1000RPM 條件下離心4 分鐘，棄去上清液，補加1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm 皿中，加入約8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS 潤洗細胞1-2 次。
2. 加2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM 條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml 含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO 后進行凍存。
注意事項：
1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意
