一、 兔骨髓間充質干細胞 產品簡介 

1. 產品名稱：兔骨髓間充質干細胞 

2. 組織來源：骨髓 

3. 產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 

4. 細胞簡介： 

兔骨髓間充質干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高，在培養過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。 

本公司生產的兔骨髓間充質干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 

5. 培養基信息： 

DMEM-F12、FBS、間充質干細胞生長添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等 

我們推薦使用兔骨髓間充質干細胞專用完全培養基作為體外培養兔骨髓間充質干細胞的培養基。 

二、使用方法 

在技術部標準操作流程下，兔骨髓間充質干細胞可傳3-5代左右，隨著傳代次數的增加，細胞會呈現老化狀態，生長速度減緩，3代以內細胞狀態最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。 

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。 

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。 

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。 

 3. 細胞傳代 

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次； 

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化； 

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養； 

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。 

三、注意事項 

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。 

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。 

3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。 

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。 

5. 該細胞只可用于科研。  

備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考