一、產品簡介

1. 產品名稱：人關節滑膜成纖維細胞

2. 組織來源：關節

3. 產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4. 細胞簡介：

滑膜是關節囊的內層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結締組織組成。關節腔內的所有結構，除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。滑膜分泌滑液，在關節活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層，即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層)，是血管豐富的關節囊內膜，貼附于非關節面部分，覆蓋于關節囊內的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為邊緣區或“裸區”。滑膜呈粉紅色，光滑發亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，內含膠原性纖維。
滑膜細胞有A、B兩型。巨噬細胞樣A型細胞，表面有絲狀偽足、漿膜內陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體，具有吞噬功能；B型成纖維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內質網結構，是介導 RA 關節破壞的主要細胞。

本公司生產的人關節滑膜成纖維細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯合消化，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.推薦培養基：

我們推薦使用原代成纖維細胞培養體系作為體外培養人關節滑膜成纖維細胞的培養基。

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法 

在技術部標準操作流程下，人關節滑膜成纖維細胞可傳5~8代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。 

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。 

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。 

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。 

3. 細胞傳代 

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次； 

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化； 

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養； 

4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。 

四、注意事項 

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。 

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。 

3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。 

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。 

5. 該細胞只可用于科研。 

 備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考